Государственная фармакопея Республики Беларусь -
Скачать (прямая ссылка):
Культуры клеток MRC-5, WI-38 и FRhL-2 признаны диплоидными и хорошо охарактеризованными; если они не модифицированы генетически, дополнительные характеристики не требуются.
Таблица 5.2.3.-1. Тестирование колоний клеток
Тест
Посев
клеток
Контрольный банк клеток (КБК)
Рабочий
банк
культур
клеток
(РБК)
Клетки на максимальном уровне удвоения популяции, или за его
8
пределами,
используемые
для
производства
1. ПРИРОДА И ЧИСТОТА
Морфология + + + +
Соответствующий + + + +
выбор из следующих
тестов: биохимический
(например,
изоферменты),
иммунологический
(например,
гистосовместимость),
цитогенетические
маркеры, состав
нулеиновой кислоты
Кариотип(диплоидные + + +(1) +(1)
колонии клеток)
Продолжительность - + +
жизни (диплоидные 2. ПОСТОРОННИЕ ВЕЩЕСТВА
колонии клеток)
Заражение бактериями - + + -
или грибами
Микоплазмы - + + -
Тесты клеточных - - + -
культур
Совместная - - +(2) +(2)
культивация
Тесты животных и яиц - - +(2) +(2)
Конкретные тесты на +(2) +(2)
возможные
загрязняющие
вещества в
зависимости от
происхождения клеток
(см. выше пункт
«Посторонние
возбудители
инфекций»
Ретровирусы - +(3) - +(3)
3. ОПУХОЛЕРОДНОСТЬ
Опухолеродность - - - +(4)
(1) Диплоидная природа устанавливается для каждого рабочего банка культур клеток, но с использованием клеток на максимальном уровне удвоения популяции, используемом для производства, или за его пределами.
9
(2) Тестирование проводится для каждого рабочего банка культур клеток, но с
использованием клеток на максимальном уровне удвоения популяции,
используемом для производства, или за его пределами.
(3) Тестирование проводится для контрольного банка культур клеток, но с
использованием клеток на максимальном уровне удвоения популяции,
используемом для производства, или за его пределами.
(4) Культура клеток MRC-5, культура клеток WI-38 и культура клеток RFhL-2 признаны неопухолеродными и не требуют тестирования. Тесты не проводятся на колониях клеток, о которых известно или предполагается, что они опухолеродны.
МЕТОДЫ ТЕСТИРОВАНИЯ ДЛЯ КЛЕТОЧНЫХ КУЛЬТУР
Идентификация. Для установления природы клеток примените анализ состава нуклеиновой кислоты и соответствующие из приведенных ниже тестов:
(1) биохимические характеристики (изоферментный анализ);
(2) иммунологические характеристики (антигены гистосовместимости);
(3) цитогенные маркеры.
Контаминация клеток. Анализ состава нуклеиновой кислоты, проводимый для идентификации, служит также для того, чтобы продемонстрировать отсутствие заражающих клеток.
Контаминация бактериями и грибами. Контрольный банк культур клеток и каждый рабочий банк культур клеток должны проходить тест на стерильность (2.6.1.), выполняемый с использованием 10 мл надосадочной жидкости из клеточных культур для каждого средства. Тест должен проводиться на 1 % контейнеров, но как минимум на 2 контейнерах.
Микоплазмы (2.6.7.). Контрольный банк культур клеток и каждый рабочий банк культур клеток должны проходить тест на микоплазмы культуральным методом и методом клеточной культуры-индикатора. В тесте должны участвовать один или несколько контейнеров.
Тесты на микроорганизмы-контаминанты. Клетки должны проходить тест на гемадсорбирующие вирусы и тесты клеточных культур на другие посторонние вещества, приведенные в главе 2.6.16 под заголовком «Производственная клеточная культура: контрольные клетки». Если клетки взяты от обезьян, они, кроме того, инокулируются в клеточные культуры печени кролика для выявления реакции на вирус герпеса В (cercopithecid herpesvirus 1).
